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2022-09-04
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和经验总结
TUNEL法的实验原理细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导
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2022-09-03
怎样冻存动物细胞?怎样去化冻动物细胞?
一、怎样冻存动物细胞?一个实验室得到一个新的细胞株后,首先要把该细胞株培养扩增后冻存起来。细胞冻存首先可以在由于污染等情况丢失细胞时有备份可用,另外几乎所有细胞在培养传代的过程中发生一定程度的变异,为了保持实验结果的一致,一般细胞在培养几十代以后就不能再使用了,需要将冻存的,传代较少的细胞化冻
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2022-09-03
关于肿瘤细胞侵袭实验原理和实验步骤
一、肿瘤细胞侵袭实验原理Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌水解酶,
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2022-09-02
细胞培养的原理和实验步骤
细胞培养:体外模拟体内需要的生长条件(温度,营养等),然后加上一些处理条件,比如做药物筛选,就可以做抗性基因的表达的筛选,比如还可以测定某个基因敲低或是过表达的产物,这个当然要结合WB来看最后基因的表达产物是否升高哦,细胞培养的应用还有很多,欢迎大家在后台留言。细胞培养的基本原理:细胞传代(生存
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2022-09-02
细胞培养过无菌操作注意事项有哪些
无菌操作是决定细胞培养成败的关键因素,即便使用设备完善的实验室,若实验者粗心大意,操作不规范,也会导致污染。因此,所有操作都要最大可能的保证无菌,每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠。1、实验进行前:在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求,准备各种所需
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2022-09-02
细胞培养生为什么长缓慢,怎么解决?
养细胞就像养孩子一样,是一件特别心累的事,要细心呵护培养,不然的话就会出现各种各样的问题,细胞不长了、不贴壁了...实在让人操碎了心。当你的细胞生长缓慢的时候你要注意以下几点原因:是否更换了不一样的培养液或血清;是否试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分;比较新血清与旧血清等;
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2022-09-02
牛血清在细胞培养中有什么作用?
血清被广泛应用于细胞培养达几十年之久。动物血清主要包括胎牛血清、小牛血清、成牛血清、马血清、羊血清、鸡血清、兔血清等,其中以胎牛血清的使用最为普遍。动物血清在细胞培养中提供细胞增殖所需的生长因子、激素、转移蛋白、贴壁和铺展在培养基质上的因子、蛋白酶抑制剂和其他营养物质。使用血清的优点是血清含
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2022-09-01
如何避免细胞培养过程中的污染
主要还是考虑无菌环境,尽量做好操作台的灭菌,别把培养基滴落在生物安全柜的入风口,别在培养箱里把培养基打翻。这两个地方霉菌一旦滋生,那你就只能等着用甲醛熏蒸了。紫外无法杀灭霉菌,酒精也不行,只能用甲醛熏蒸,但是一定要注意安全。复苏的时候,水浴锅也需要进行灭菌处理。一旦出现污染,不要急,能救的就
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2022-09-01
如何确认细胞有无交叉污染
交叉污染虽不如微生物污染普遍,但与HELA细胞及其他生长迅速的细胞系间广泛的交叉污染是个明确的问题,会造成严重后果。从声誉好的细胞库获取细胞系、定期检查细胞系性质及采用良好的无菌技术有助于避免交叉污染。通过DNA指纹图谱、核型分析和同位素分析可确认有无交叉污染。血清与培养基通常血清的添加
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