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2022-11-10
细胞粘附的细胞分离技术
大多数细胞分离程序之前都是尽可能多地去除无关材料,尤其是当新鲜分离的组织是起始材料时。下面列举了一些常见的过程。实体组织的消化/分解——需要首先将整个组织的碎片分解成单细胞悬浮液。表 2 总结了常用方法,试剂盒可用, Miltenyi Biotec的神经和肿瘤组织分离试剂盒。Thermo Fisher / Gibco 的胶原酶和 T
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2022-11-10
单细胞测序技术在遗传学和蛋白质组学的应用
单细胞测序技术在通量、成本和功效方面的持续进步使得对大量单个细胞的分析变得可行。现在可以针对单个细胞分析生物学中心法则的所有关键分子,包括 DNA、RNA(在细胞和细胞核中)和蛋白质组。单细胞遗传信息分析涉及三个关键步骤:分离或分类、裂解和分析。排序过程可以使用单细胞测序技术进行。方法的选择取决于
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2022-11-10
贴壁细胞传代培养步骤 (传代大鼠骨髓充间质干细胞为例)
传代培养是细胞培养常规保种方法之一,也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释,分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细的无菌操作。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化
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2022-11-09
在生物医学实验哪种细胞不增殖
在生物医学实验中,常常会用到大量的细胞进行实验,而往往通过各种渠道得来的细胞数量都有限,无法满足实验过程中所需要的细胞数量,所以为了使实验更顺利的进行,科研人员往往需要前期对所需的细胞进行扩充培养,以便在后期的实验中,可以不间断使用。通常的细胞实验中,很多科研人员都会根据实验方案选择常见的细
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2022-11-09
双抗细胞有什么作用,能避免被微生物污染吗
配制完培时,会根据情况加入很多添加物,其中就有双抗。双抗是指青霉素和链霉素按一定比例混合的抗生素溶液,它对微生物生长具有一定的抑制作用。但不少同学存在一个误区,就是加入的双抗可以杀灭细菌,加入双抗后,细胞就可以避免被微生物污染。其实并不是,双抗仅仅能对培养环境中的微生物繁殖产生一定的抑制
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2022-11-09
培养细胞需要多少血清,合适的血清浓度是多少
配制完培时,是按10%加入血清还是15%、或甚至20%?加多了,经费在燃烧,加少了,细胞长不不好。如何优化出最合适的血清浓度?我们可以通过观察几个参数来判断,其中一个叫贴壁效率。具体做法是:将细胞以一个非常低的密度接种于多个培养瓶,例如1000个/瓶,然后使用含不同浓度血清的完培分别培养这几瓶细胞,例
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2022-11-09
细胞污染如何识别(辨别细胞污染的经验)
在培养细胞过程中,同学们最担心的就是细胞污染。因此,今天给大家分享如何辨别细胞污染的经验,赶快学起来吧~一、肉眼观察把培养瓶或培养皿拿起来,对者光线检查●浑浊情况:即使细胞密度很高,培养基也应该是透明的。轻轻移动或晃动培养瓶,观察培养基的浑浊或悬浮情况,一些霉菌可能会在培养基的表面形成
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2022-11-08
如何才能把细胞培养好起来(细胞培养的步骤以及注意事项)
一、细胞培养的基本概念(1)基本概念细胞培养:狭义的细胞培养主要是指分离(散)细胞培养,广义的细胞培养还包括单(个)细胞培养又称克隆(clone),是指单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。原代培养:即第一次培养,指将培养物放在体外生长环境中持
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2022-11-08
测定蛋白含量有什么方法(附带步骤)
蛋白的含量的测定方法主要有紫外分光光度法、Lowry法、BCA法等。紫外分光光度法原理蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环在275~280mm有一紫外吸收峰。在一定浓度范围内,其在280mm的吸光度与蛋白浓度成正比。方法取适量蛋白溶液(约3.5ml),置于光径为1cm的石英比色杯、用与溶解蛋白的缓冲液相同的
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