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细胞被支原体污染了怎么办(有效把支原体污染赶出细胞方法)

2023-04-26 10:26:24
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  对于已耗费很多时间、大量扩增起来的细胞,或经过基因转染、体外刺激等大量工作处理过的细胞,如果发现细胞被支原体污染了,怎么办?小编为您分析如何有效把支原体污染赶出你的细胞!

  由于期工作量巨大,我们无法丢弃已有细胞。但由于价格原因,又无法使用那些昂贵试剂杀除细胞上的支原体,同时,实验人员还需要清除细胞上的支原体污染,让实验得以往下推进,以终获得准确的实验数据。

  实验者可选用对支原体*的抑制剂,通过对细胞的期处理,中期加药,逐步通过4代左右的培养,从而将支原体污染彻,底清除,确保试验顺利推进,结果准确。

  支原体污染对细胞培养造成多方面的不良影响,已经成为在细胞培养时的一个严重问题,保守估计常规细胞培养中支原体污染率为15-35%,严重干扰实验结果的可信度。因此,定期进行支原体检测和去除,确保无支原体存在细胞培养体系内才能获得准确有效的实验数据。

  什么是支原体(Mycoplasma)

  支原体又称霉形体,直径在0.1-0.3μm,是目发现的小的-简单的原核生物,可以轻松地通过滤膜,混入培养系统中,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态。通常依附在细胞膜表面,支原体没有刚性的细胞壁,因此普通的抗生素对它根本不起作用,实验室常见的种类有:口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、发酵支原体、人型支原体、唾液支原体、肺支原体和梨支原体等。

  支原体污染的后果

  细菌和真菌造成的污染相对比较容易检测、预防和去除,然而支原体造成的污染很难察觉,即使生长密度高达107-109CFU/ml,也很难有污染迹象(浑浊、pH变化等)。支原体污染后导致细胞生长变慢,状态变差,不会马上使细胞致死,但会影响细胞内的各种参数,如改变细胞膜抗原性,改变细胞新陈代谢,干扰核酸的合成,改变DNA转染效率,导致染色体畸变等。

  典型的支原体污染来源

  ①细胞之间交叉污染;

  ②工作环境或实验器材的污染;

  ③实验者无菌操作不佳;

  ④培养基或其他试剂污染;

  ⑤制备细胞的原始组织或器官的污染;

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