细胞培养指在体外模拟体内环境，使细胞能够生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。传统的细胞体外培养方法为2D细胞培养，但这种培养方式容易使细胞失去原本的功能特征和分化能力，并且无法模拟细胞在体内所处的三维环境。为了规避这类风险，同时随着培养技术的发展，3D细胞培养应运而生。

　　一、3D细胞培养定义

　　3D细胞培养是一种在人工创造的环境中生物细胞可以在所有三维空间中生长的技术，使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长，构成三维的细胞载体复合物，3D细胞培养允许细胞在体外向各个方向生长，类似于它们在体内的生长方式。3D培养技术既能保留体内细胞微环境的物质及结构基础，又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。

　　二、3D细胞培养优势

　　在体外模拟复杂的组织结构和体内形态，接近体内正常细胞生长环境

　　展示分化等细胞活动和细胞间反应，实现真实的细胞生物学和功能

　　准确建立靶组织模型，有效预测病程和药物反应

　　使用少量细胞数，实现快速生长，兼容自动化仪器，降低成本

　　三、3D细胞培养常用的技术

　　3D细胞培养技术使诸多科研工作者从中受益，因此在过去十年里，研究人员也不断开发出更多3D细胞培养系统，使研究人员可以在体外保持细胞的天然3D结构，改善细胞培养环境，辅助它们生长于更接近体内的环境条件中。3D细胞培养技术很多，但其中最为普遍使用的是3D基质胶培养技术。

　　目前市场上出现各种各样的基质胶产品，产品良莠不齐，其中最为人熟知的则是康宁的基质胶系列，也是最多人在使用的基质胶产品。但碍于产品进口且为动物来源制作，往往产品面临货期长和生产供应不上的尴尬局面，导致很多人实验做不下去的境况。基于这种情况，今天给大家介绍一款供货稳定且为植物来源的3D细胞培养基质胶在3D细胞培养实验中的应用和实验步骤——美国Biozellen®3D 细胞培养基质胶！

　　其主要特点为：

　　1、100%植物源材料，无任何动物成分；

　　2、氨基酸序列100%人源化 ；

　　3、可调控基质胶硬度进行多种细胞培养；

　　4、3D培养结束后基质胶可以温和融化，并保留3D细胞/类器官结构完整性；

　　5、3D细胞/类器官培养种类数量范围更广

　　6、无人畜共通病原菌或毒素风险；

　　7、最适用于医疗级生物原料；

　　8、高活性、高纯度、可融化；

　　9、4度运输、4度保存；

　　10、2年保存时间。

　　四、在3D 细胞球体培养实验步骤：

　　A、试剂制备

　　1、A 基质胶：将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟， 确认完全融解。

　　2、C 缓冲溶液(1X)制备：使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如： 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) 。

　　3、D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液。