关于细胞冻存的10大理由以及冻存条件(10大不得不冻存细胞的理由)

2022-08-30 10:31:33

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　　随着实验室细胞培养的发展，除了原代培养之外，还将建立开发或获得众多的细胞系。每一个细胞系均扩大了其起源细胞的应用，成为有价值的资源。若该细胞系颇为独特，则其可能是不可替换的；替换至少也是昂贵与耗时的。因此，必须通过保存细胞系来保证这种重要投资。

　　由于培养早期传代培养的选择，有限细胞系的衰老以及连续细胞系的遗传和表现不稳定性，使细胞系在连续培养时有变异倾向。此外，即使在管理最好的实验室中也有可能发生仪器故障和污染。交叉污染以及错误辨识的发生率也很高。因此，存在诸多理由进行冷冻储存细胞，总体概述有10大不得不冻存细胞的理由：

　　（1）由于遗传不稳定性而导致基因漂移；

　　（2）衰老，最后导致细胞系消失；

　　（3）生长特性的转化以及恶性相关特性的获得；

　　（4）由于选择和去分化导致表型的不稳定性；

　　（5）微生物污染；

　　（6）其他细胞系的交叉污染；

　　（7）由于操作粗心而导致的错误鉴别；

　　（8）孵育箱故障；

　　（9）对于保存那些不立即使用的细胞系，可节省时间和材料；

　　（10）需要将细胞系转给其他使用者。

　　在考虑冻存细胞之前，需满足以下特定条件：

　　1.确认冻存前需证实细胞系未受污染，且确为该细胞系。尽管对于新获得的细胞系，可以在完全确认前冻存几支，但在大量冻存前应进行彻底确认。

　　2.冻存时间，如果是有限细胞系，这些细胞应经5代倍增生长，获得足够量的细胞再进行冻存。连续细胞系应将其克隆化，选择特征性的克隆，待生长至足够数量再进行冻存。连续细胞系有其优势：它们可无限生长，生长比较迅速，容易克隆，但是它们缺乏遗传稳定性。有限细胞系通常或接近二倍体。在一定传代水平间是稳定的，但是，它们很难克隆，生长缓慢，最终死亡或发生转化。

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