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关于细胞冻存的10大理由以及冻存条件(10大不得不冻存细胞的理由)

2022-08-30 10:31:33
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  随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,还将建立开发或获得众多的细胞系。每一个细胞系均扩大了其起源细胞的应用,成为有价值的资源。若该细胞系颇为独特,则其可能是不可替换的;替换至少也是昂贵与耗时的。因此,必须通过保存细胞系来保证这种重要投资。

  由于培养早期传代培养的选择,有限细胞系的衰老以及连续细胞系的遗传和表现不稳定性,使细胞系在连续培养时有变异倾向。此外,即使在管理最好的实验室中也有可能发生仪器故障和污染。交叉污染以及错误辨识的发生率也很高。因此,存在诸多理由进行冷冻储存细胞,总体概述有10大不得不冻存细胞的理由

  (1)由于遗传不稳定性而导致基因漂移;

  (2)衰老,最后导致细胞系消失;

  (3)生长特性的转化以及恶性相关特性的获得;

  (4)由于选择和去分化导致表型的不稳定性;

  (5)微生物污染;

  (6)其他细胞系的交叉污染;

  (7)由于操作粗心而导致的错误鉴别;

  (8)孵育箱故障;

  (9)对于保存那些不立即使用的细胞系,可节省时间和材料;

  (10)需要将细胞系转给其他使用者。

  在考虑冻存细胞之前,需满足以下特定条件

  1.确认冻存前需证实细胞系未受污染,且确为该细胞系。尽管对于新获得的细胞系,可以在完全确认前冻存几支,但在大量冻存前应进行彻底确认。

  2.冻存时间,如果是有限细胞系,这些细胞应经5代倍增生长,获得足够量的细胞再进行冻存。连续细胞系应将其克隆化,选择特征性的克隆,待生长至足够数量再进行冻存。连续细胞系有其优势:它们可无限生长,生长比较迅速,容易克隆,但是它们缺乏遗传稳定性。有限细胞系通常或接近二倍体。在一定传代水平间是稳定的,但是,它们很难克隆,生长缓慢,最终死亡或发生转化。

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