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检测细胞凋亡的常用方法

2022-05-24 10:34:16
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  众所周知细胞的凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞,在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面我们来介绍以下几种我们常用的测定方法。

  (一)细胞凋亡的形态学检测

  根据凋亡细胞的一种固有的形态特征,人们已经设计许许多多不同的细胞凋亡形态学检测方法。

  1 光学显微镜和倒置显微镜

  (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。

  贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。

  (2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割

  成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。

  2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜

  一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。

  3 透射电子显微镜观察

  结果评判:凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构;ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。

检测细胞凋亡的常用方法

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