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病理实验:冰冻切片实验步骤(操作方法及步骤)

2021-09-10 02:28:01
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  冰冻切片实验步骤:固定,脱水,提到脱水,透明,浸蜡,包埋,切片。冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到硬度,然后进行切片的方法; 因其制作过程较石蜡切片快捷、简便, 而多应用于手术中的快速病理诊断。

  一、冰冻切片服务介绍

  冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冰冻切片法,二氧化碳冰冻切片法,甲醇循环制冷冰冻切片法等。

  二、冰冻切片应用

  (1)在手术进行中,突然发现病人的病变与原诊断,原定手术方案不相符合,或者怀疑时,需要病理确定。

  (2)了解**结内是否有转移的肿瘤细胞,或者转移的程度,以利于确定是否需要扫除**结或者其它的**措施。

  (3)对于已确定为恶性肿瘤的患者,则需要了解其手术范围是否足够,上下切缘是否有残存的肿瘤组织。

  (4)在做剖腹探查时所发现的肿块或者异样的组织。

  (5)显示组织中的脂肪和脂类物质,这常见于某些病例如脂肪瘤及肉瘤,某些科研组织等。

  (6)某些酶的显示如ATP酶,琥珀酸脱氢酶等。

病理实验

  (7)神经病理学技术中的某些染色法如:Eager氏法,Marchi氏法,Cajal氏法,Hortega氏法和Holzer氏法等。

  (8)对某些物质所进行的**荧光的研究。

  三、冰冻切片操作方法及步骤

  ①取材,未能固定的组织取材,不能太大太厚,厚者冰冻费时,大者难以切完整,好为24×24×2mm。

  ②取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上,冰冻。小组织的应先取一支承器,滴上包埋剂让其冷冻,形成一个小台后,再放上细小组织,滴上包埋剂。

  ③将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。

  ④调好欲切的厚度,根据不同的组织而定,原则上是细胞密集的薄切,纤维多细胞稀的可稍为厚切,一般在5~10um间。

  ⑤调好防卷板。制作冰冻切片,关键在于防卷板的调节上,这就要求操作者要细心,准确地将其调较好,调校至适当的位置。切片时,切出的切片能在时间顺利地通过刀防卷板间的通道,平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板,取一载玻片,将其附贴上即可。

  ⑥应视不同的组织选择不同的冷冻度。冷冻箱中冷冻度的高低,主要根据不同的组织而定,不能一概而论。如:切未经固定的脑组织,肝组织和**结时,冷冻箱中的温度不能调太低,在-10- -15℃左右,切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时,可调在-15~20℃左右,切带脂肪的组织时,应调至-25℃左右,切含大量的脂肪时,应调至-30℃。

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