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细胞凋亡的机制(细胞凋亡的例子)

2022-03-02 10:35:06
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  细胞凋亡(apoptosis):属于细胞程序性死亡(Programmed Cell Death,PCD),是由基因控制的细胞自主、有序的死亡,在维持生物体内环境稳定方面发挥着重要作用。蝌蚪发育成青蛙的过程中,尾的消失就是生物学中典型的细胞凋亡现象。

  细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子机制。细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段:接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→进入连续反应过程。

  细 胞 凋 亡 典 型 特 征

  从形态学角度观察细胞凋亡,其过程是多阶段的,首先是细胞体积缩小,连接消失,与周围的细胞脱离;然后是细胞质密度增加,线粒体膜电位消失,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆;核质浓缩,核膜核仁破碎;胞膜有小泡状形成,膜内侧磷脂酰丝氨酸翻到膜外表面;Caspase活化,DNA降解成为约180bp-200bp片段;最终可将凋亡细胞遗骸分割包裹为几个凋亡小体,无内容物外溢,因此不引起周围的炎症反应。凋亡小体可迅速被周围专职或非专职吞噬细胞吞噬。

细胞凋亡

  早期事件:

  磷脂酰丝氨酸外翻

  线粒体受损

  细胞色素C释放

  中期事件:

  Caspase活化

  晚期事件:

  DNA片段化

  凋亡小体形成

  细胞凋亡与疾病的关系

  对于人而言,健康状况下,机体内细胞凋亡处于一个平衡状态。当细胞凋亡出现异常,就极易引发各种疾病。

细胞凋亡与疾病的关系

  nnexin V检测凋亡七大要点

  1.接种——对数生长

  细胞密度通常不超过1×106/ml,以免引起凋亡。

  2. 收集——上清及铁壁细胞全部收集

  部分凋亡细胞可能悬浮于培养上清中,须先收集上清,离心收集沉淀,再消化收集贴壁细胞,合并上清和消化下来的细胞。

选用Accutase酶替代普通胰酶

  3. 消化——选用Accutase酶

  选用Accutase酶替代普通胰酶。Accutase酶已经在多种细胞系中得到验证,其消化更温和,可有效避免因消化过度使细胞膜的磷脂酰丝氨酸外翻,造成假阳性。(对凋亡不明显的实验强烈推荐)

  4. 补偿调节——阳性质控

  没有明显的凋亡,该如何调节补偿以及设门?

  5. 电压——足够大

  大到快要超出边界。

  6. 补偿——横平竖直

  3、4象限横平;2、4象限竖直。

  7. 漂亮结果——黄金分割(三分原则)

  细胞凋亡的例子

  (1)清除多余无用的细胞(如蝌蚪尾巴的消失)。

  (2)清除衰老细胞(如皮肤表皮细胞)。

  (3)清除体内有害细胞(如癌细胞)。

  (4)清除被病原体感染的细胞(如被病毒入侵的细胞)。

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