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细胞实验外包:细胞凋亡实验(细胞死亡原因方式及过程)

2021-11-23 10:44:13
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  细胞凋亡的过程是细胞死亡中的研究热门课题,接下来本文会讲一下细胞实验中细胞凋亡的原因及方式,以及相关的一些研究工具,希望对大家有所帮助!

  一、细胞死亡的原因及方式

  细胞死亡是生命现象不可逆停止及生命的结束,正常的组织中经常发生细胞死亡,是维持组织机能和形态所必须的,常见的细胞死亡原因及方式主要有以下几种:

细胞凋亡实验

  生存还是死亡,其实细胞家族每天都在做着这样的选择——不仅是选择是否死去,还选择了如何死去。

  二、细胞凋亡的过程

  细胞凋亡是1973年Kerr和Wyllin 最先提出这一概念。细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段:接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→进入连续反应过程。

  细胞处于不同的凋亡阶段具有不同的生物学特征,典型的特征包括:1)细胞膜PS(磷脂酰丝氨酸)外翻;2)线粒体膜电位丧失;3)细胞核浓缩和断裂。此外在各个不同的时期:

细胞凋亡的过程

  三、如何检测晚期时的细胞特征?

  细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同,如何检测晚期时的细胞特征?

  细胞凋亡晚期,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。TUNEL实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,在细胞凋亡的研究中被广泛采用。

细胞凋亡晚期

  四、细胞凋亡晚期检测工具

  Abbkine的TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒【TUNEL凋亡检测试剂盒 (绿色荧光),KTA2010;TUNEL凋亡检测试剂盒 (橙色荧光),KTA2011】提供实验所需的全套试剂组分以及优化的实验方案,适用于荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪。适用于样品类型:贴壁细胞,悬浮细胞,石蜡包埋组织切片,冰冻切片。

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