资讯动态

细胞分选的原理(流式细胞分选的特点)

2022-03-30 10:37:49
|
访问量:113882

  流式细胞仪(Flow Cytometer)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,可以每秒钟分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数。其应用范围非常广泛,而且还在不断增加。当然,细胞分选也是它的重要应用之一。它能够根据每个细胞的光散射和荧光特征,将特定的细胞从细胞群体中分选出来。每次一个细胞。所以人们又常常将流式细胞仪称为荧光激活细胞分选仪(fluorescence-activated cell sorter, FACS),其实FACS并不是流式细胞仪的通称,它是BD公司的注册商标。

  细胞分选的原理

  当经荧光染色或标记的单细胞悬液放入样品管中,被高压压入流动室内。流动室内充满鞘液,在鞘液的包裹和推动下,细胞被排成单列,以一定速度从流动室喷口喷出。在流动室的喷口上配有一个超高频的压电晶体,充电后振动,使喷出的液流断裂为均匀的液滴,待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正、负不同的电荷,当液滴流经过带有几千伏的偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,没有充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。

  流式细胞分选的特点

  1. 少量细胞分选时,流式细胞分选精确度高(99%以上),速度快。目前,先进的流式细胞仪的分选速度可达25 000个细胞/秒以上,比传统的分选速度提高了很多倍,原来需要一天的工作现在只需要几小时就能完成。不过流式细胞仪分离细胞的量还是有一定的限制,一次分离的最大合理量约为108个细胞。如果细胞量超过109个,则需要耗费10小时以上,分选后细胞的活力会受到很大的影响。

  2. 可以同时进行多个Marker分选,正选负选同时进行。以前的流式细胞仪只能给液滴充上正电荷或负电荷,因此在电场中只能向左或向右偏转,即两路分选。现在的仪器可以给液滴充以不同的电量,从而调整液滴的偏转角度,实现多路分选。BD的FACSAria流式细胞仪就可以进行四路分选。

  3. 不仅仅限于表面抗原,流式细胞仪可以根据任何能检测到的发光度(如细胞体积)或荧光(如DNA、RNA或蛋白含量,酶活性,特异抗原)散射度差异来分离细胞。如果能保证流式细胞仪的无菌状态,那么分选后的细胞还可以进行培养或其他分析。

  4. 如果只是偶尔做几次细胞分选的话,用流式分选还是比较划算的,只需要准备样品和抗体,交纳一定的仪器使用费即可,不需要购买配套的设备。


文章推荐
基因检测:基因研究揭示导致神经元变性以及相关疾病发生的分子机制
2021-08-30
运动神经元控制运动,呼吸,吞咽和说话等行为。运动神经元的死亡是进···
RNA特性、结构、类型和功能(rna的类型及其结构和功能特点)
2022-02-03
RNA或核糖核酸是核苷酸的聚合物,由核糖、磷酸盐和诸如腺嘌呤、鸟嘌呤···
流式细胞仪原理及应用(流式细胞术实验步骤类型、用途)
2022-01-17
流式细胞仪是一种基于激光的标准技术,用于检测和测量异质流体混合物···
细胞凋亡检测实验步骤(细胞凋亡实验步骤及注意事项)
2022-03-24
一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征2、学会用荧光探针对细胞进行···
喜报|立效顺利取得浙江省病原微生物实验室备案证书!
2024-09-09
8月19日,经过绍兴市卫生健康委严格审查和现场核查后,立效(浙江百越···
【声明】强烈谴责假冒「立效」的行为!请大家提高警惕!
2024-03-25
近日,科研服务市场上出现多起不法分子冒用「立效」名义进行服务宣传···
大鼠心脏纤维化造模操作步骤(手把手教你做大鼠心脏纤维化造模实验)
2023-04-16
心肌钙化,又称为心肌纤维化,是由中、重度的冠状动脉粥样硬化性狭窄···
细胞传代实验操作步骤(手把手教你做细胞传代实验)
2023-04-16
传代培养是细胞培养常规保种方法之⼀,也是几乎所有细胞生物学实验的···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!