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细胞不贴壁是什么原因导致的,如何促进细胞贴壁
细胞不贴壁的一些原因1. 胰酶消化时间把控不当:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。2. 缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降...
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贴壁细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好怎么办
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,这些问题从细胞生长角度来说,针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好,甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因:胰蛋白酶消化过度;支原体污染;培养基pH值过碱(NaHCO3分解);细胞老化;接种细胞起始...
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细胞培养方瓶有什么特点
细胞培养瓶是一种细胞培养过程中常用的耗材,主要是哦杨玉实验室中等规模细胞和组织的培养。采用聚苯乙烯原料,常见规格包括25cm2、75cm2、175cm2和225cm2等,根据表面处理工艺的不同分为亲水性(适于贴壁细胞培养)和疏水性(适于悬浮细胞培养)两种。细胞生长需要特定的环境,如无菌、渗透压、温度、PH值等,为了适...
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细胞复苏需要用到哪些细胞培养耗材
细胞复苏是与相反的过程,即是细胞恢复生长的过程,是将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养。那么细胞复苏需要用到哪些细胞培养耗材,其步骤又是怎样的呢?细胞复苏与细胞冻存不同,其过程升温要快,防止在解冻过程中水分进入细胞,形成冰晶,影响细胞存活。需要用到的细胞培养耗材包括培养瓶、吸头、...
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细胞实验中提取细胞质和细胞核蛋白的操作步骤
在细胞实验中提取细胞质和细胞核蛋白的操作步骤:1.决定细胞生长状态,细胞生长状态应该是80%或者更好:2.用离心机以1500r/min离心5min3.弃上清液,用等体积的冷PBS洗细胞,像步骤2那样,反复3次4.根据估计的沉淀量加入5倍体积的isotonic lysis buffer到细胞颗粒中,使细胞温和悬浮,尽量避免泡沫5...
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细胞实验中徒手切割法体细胞克隆研究进展
1997年2月,英国<Nature》杂志报道了英国罗斯林研究所的Wilmut等利用绵羊乳腺细胞进行核移植试验,成功地获得了上只体细胞克隆绵羊——多利(Dolly)。这一成果有力地证明了成年哺乳动物的体细胞仍具有发育上的全能性,从而开创了哺乳动物细胞核移植的新里程碑,在生物科学史上具有十分重要的意义。到目前为止,体细胞...
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细胞的冻存和复苏操作步骤
一、原理在不加条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。...
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目前制作脑梗塞动物模型的几种方法
1.目前脑梗塞动物模型制作方法有以下几种。1.1 光化学法腹腔内麻醉后,消毒并纵向切开头皮,暴露右侧颅骨,小心分离骨膜以免损伤颅骨表面影响其透光性。颅骨表面覆以中间带圆孔的避光纸,其下为感觉运动皮质中枢。从股静脉缓慢注入2%玫瑰红B后,将大鼠固定于立体定位仪上,冷光源探头贴近暴露的颅骨。此法优点在...
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细胞冻存和复苏实验实验步骤
细胞冻存和复苏可以用于:(1)用于生物学保种;(2)用于医学上研究干细胞;(3)用于传代培养。实验方法原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样能够大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存大多数都采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提升细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的...
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细胞周期同步化几种常用的方法
在一般培养条件下,群体中的细胞处于不同的细胞周期时相之中。为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡,故常需借助某种自然或人工的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相的现象,这就是细胞同步化技术。由于细胞群体受到多种条件限制,对结果有很大影响,所以一般采用人工同...