• 有机合成后处理方法

    有机合成后处理方法

    只要找对了合成方法,合成任务就可以事半功倍了,这话不错,正确地合成方法固然重要,但是有机合成的任务是在有机合成中,后处理的问题往往被大多数人所忽略,认为只要找对了合成方法,合成任纯的产品,任何反应没有100%产率的,总要伴随或多或少的副反应,产生或多或少的杂质,反应完成后,面临的巨大问题就是从反应混合...

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  • ChIP(染色质免疫沉淀)实验心得

    ChIP(染色质免疫沉淀)实验心得

    基于体内分析而发展的染色质免疫沉淀分析(Chromatin immunoprecipitation assay kit,ChIP)技术可以真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白。由于ChIP采用甲醛固定活细胞或者组织的方法,因此能比较真实的反映细胞内TF与Promoter的结合情况,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。近年来,这种技...

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  • ChIP免疫沉淀实验流程(两种方法)

    ChIP免疫沉淀实验流程(两种方法)

    免疫沉淀实验流程目前主要有两种不同的ChIP实验方法:1.2 Cross-liking Chromatin Immunoprecitation (交联染色质免疫沉淀,X-ChIP)1.甲醛处理细胞,使 DNA-protein 的相互结合作用被交联固定。2.裂解细胞,得到全细胞裂解液。3.超声处理,将基因组 DNA 打断至 100-500bp。4.抗体免疫沉淀:在细胞...

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  • 双萤光素酶报告基因检测系统应用与操作流程

    双萤光素酶报告基因检测系统应用与操作流程

    自1990年萤光素酶生物传感器技术诞生以来,单萤光素酶检测系统到双萤光素酶检测系统的发展,为科研人员提供了更为严谨的实验手段。双萤光素酶报告基因检测系统在单报告基因的基础上引入了“内参对照”报告基因,可以排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰,起到校正的作用,从而使实验结果更为可...

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  • 双荧光素酶报告基因检测原理及常见问题分析

    双荧光素酶报告基因检测原理及常见问题分析

    荧光素酶(luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称,其中具有代表性的是从甲虫中分离得到的萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和从海肾中分离得到的海肾荧光素酶(Renilla luciferase)。由于两种酶底物和发光颜色的区别,且在动物体内无内源性表达,使其在双报告实验中得到广泛应用。检测原理...

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  • 传代培养实验操作步骤

    传代培养实验操作步骤

    传代培养实验操作步骤1 贴壁培养细胞传代培养操作步骤如下:(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的胰蛋白酶,一般应覆盖...

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  • qPCR 实验准备和操作全过程的经验包

    qPCR 实验准备和操作全过程的经验包

    一、前期保姆式准备,实验期间有备无患!1. 实验仪器:移液枪、qPCR 仪要定期校准(较准周期一般是 1 年),保证仪器准确性。2. 引物:引物设计后进行有效性验证,选取扩增效率在 90%~110% 之间,且融解曲线单峰的引物,保证其高效的扩增效率和特异性。3. 内参:如何选择、如何验证?选择:(1)通...

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  • 干细胞的五大作用

    干细胞的五大作用

    干细胞的五大作用1替代和修复死亡和受损伤的细胞干细胞具有自动归巢的特性,在进入人体后,会聚集到受损的器官和相应的部位,并分化为这些器官和部位的特异性细胞。并在目标组织内的微环境作用下,会长出新的细胞与组织,修复受损组织。2激活休眠和处于抑制状态的细胞人体的生长发育是通过细胞分裂完成...

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  • 吞噬细胞在细胞免疫中的作用

    吞噬细胞在细胞免疫中的作用

    吞噬细胞是指具有吞噬能力的细胞,它们可以通过吞噬外来物质来保护机体免受病原体侵害。在细胞免疫中,吞噬细胞具有重要作用。它们可以吞噬病毒、细菌、真菌、寄生虫等外来物质,并分解其中的毒素或毒素产物,阻止它们对机体造成损害。吞噬细胞还能够吞噬细胞内的过氧化物、氧化产物和其他有害物质,保护细胞免受氧化损...

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  • 用胰酶消化贴壁细胞应注意哪些细节

    用胰酶消化贴壁细胞应注意哪些细节

    胰酶消化贴壁细胞是指利用胰酶将贴壁细胞内的蛋白质、核酸等分子分解成小分子,以便于细胞内的代谢过程。贴壁细胞是指与细胞培养基中的基质紧密接触的细胞,它们通常具有较高的活性和分化能力。胰酶消化贴壁细胞可以帮助提高细胞内的代谢效率,有助于研究细胞的生长、分化、代谢等过程。胰酶使用注意:1、在使用...

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