-
-
ChIP（染色质免疫沉淀）实验心得
基于体内分析而发展的染色质免疫沉淀分析（Chromatin immunoprecipitation assay kit,ChIP）技术可以真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白。由于ChIP采用甲醛固定活细胞或者组织的方法，因此能比较真实的反映细胞内TF与Promoter的结合情况，还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。近年来，这种技...
-
ChIP免疫沉淀实验流程（两种方法）
免疫沉淀实验流程目前主要有两种不同的ChIP实验方法：1.2 Cross-liking Chromatin Immunoprecitation (交联染色质免疫沉淀，X-ChIP)1.甲醛处理细胞，使 DNA-protein 的相互结合作用被交联固定。2.裂解细胞，得到全细胞裂解液。3.超声处理，将基因组 DNA 打断至 100-500bp。4.抗体免疫沉淀：在细胞...
-
双萤光素酶报告基因检测系统应用与操作流程
自1990年萤光素酶生物传感器技术诞生以来，单萤光素酶检测系统到双萤光素酶检测系统的发展，为科研人员提供了更为严谨的实验手段。双萤光素酶报告基因检测系统在单报告基因的基础上引入了“内参对照”报告基因，可以排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰，起到校正的作用，从而使实验结果更为可...
-
双荧光素酶报告基因检测原理及常见问题分析
荧光素酶（luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称，其中具有代表性的是从甲虫中分离得到的萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）和从海肾中分离得到的海肾荧光素酶（Renilla luciferase）。由于两种酶底物和发光颜色的区别，且在动物体内无内源性表达，使其在双报告实验中得到广泛应用。检测原理...
-
传代培养实验操作步骤
传代培养实验操作步骤1 贴壁培养细胞传代培养操作步骤如下：（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的胰蛋白酶，一般应覆盖...
-
qPCR 实验准备和操作全过程的经验包
一、前期保姆式准备，实验期间有备无患！1. 实验仪器：移液枪、qPCR 仪要定期校准（较准周期一般是 1 年），保证仪器准确性。2. 引物：引物设计后进行有效性验证，选取扩增效率在 90%～110% 之间，且融解曲线单峰的引物，保证其高效的扩增效率和特异性。3. 内参：如何选择、如何验证？选择：（1）通...
-
-
吞噬细胞在细胞免疫中的作用
吞噬细胞是指具有吞噬能力的细胞，它们可以通过吞噬外来物质来保护机体免受病原体侵害。在细胞免疫中，吞噬细胞具有重要作用。它们可以吞噬病毒、细菌、真菌、寄生虫等外来物质，并分解其中的毒素或毒素产物，阻止它们对机体造成损害。吞噬细胞还能够吞噬细胞内的过氧化物、氧化产物和其他有害物质，保护细胞免受氧化损...
-
用胰酶消化贴壁细胞应注意哪些细节
胰酶消化贴壁细胞是指利用胰酶将贴壁细胞内的蛋白质、核酸等分子分解成小分子，以便于细胞内的代谢过程。贴壁细胞是指与细胞培养基中的基质紧密接触的细胞，它们通常具有较高的活性和分化能力。胰酶消化贴壁细胞可以帮助提高细胞内的代谢效率，有助于研究细胞的生长、分化、代谢等过程。胰酶使用注意：1、在使用...
